Mojo Jojo

Là nhân vật phản diện đầu tiên xuất hiện trong phim, vốn là một chú khỉ trong sở thú bị bắt nạt và đã bị trúng tia hóa chất Z màu đen, vì vậy não hắn lồi ra, phải đội một cái mũ cao sọc tím để che đi. Trong những tập đầu, khi chưa biết chế tạo rô bốt thì Mojo có thể bay và tạo lốc xoáy bằng cách xoay người (tập 3). Sau đó, hắn tìm được một căn nhà ổ chuột trên phố và quyết định sẽ sống tại đó. Mojo đã xây một căn cứ bí mật dưới lòng căn nhà để chế tạo rô bốt ở đó. Hắn rất thích ăn trái cây, đặc biệt là chuối. Là người tạo ra các Rowdyruff Boys. Khi nói thì thường thêm đuôi "mojo" ở cuối câu. Biểu tượng của hắn là nải chuối chín.

Công chúa Himeko

Lồng tiếng Nhật bởi Chigusa

Cô bị trúng tia Z màu đen khi vừa tìm thấy chú mèo Sappire ở trong vườn. Do tay cô đang ôm chú mèo, vì cô cầm vào đuôi nó nên cô biến hình mỗi khi Sappire hét lên. Quần áo thường ngày của Himeko là một chiếc váy dạ hội ngắn màu hồng tím với một viên ngọc sappire ở ngực, thắt lưng bằng ruy băng tím được buộc thành một cái nơ, đôi vớ trắng, đôi giày màu đỏ đậm và điểm đặc trưng là một cái vương miện nhỏ trên đầu với hai bím tóc to xoăn tít ở hai bên đầu. Mắt cô có màu đỏ với tròng hình ngôi sao, điểm đặc biệt của gia đình cô, dưới mỗi bên mắt là 3 nốt tàn nhang. Himeko với cô chị gái Duchess Morbuck đầy tài năng đều rất ghét Powerpuff Girls Z vì họ nổi tiếng hơn mình. Thường ngày, cô nổi tiếng ở lớp vì phần lớn là giàu nhất trường, phần nhỏ là vì cô cũng khá xinh và phần nhỏ còn lại là vì cô cũng hơi thông minh một chút. Cô học cùng lớp với Powerpuff Girls Z, ngồi bàn đầu dãy 3 từ cửa lớp vào, hai bên là hai cô bạn thân hay xu nịnh của cô. Khi biến hình, Himeko mang vớ đen, tóc xù hẳn lên và chuyển màu đỏ, còn mắt chuyển thành màu vàng. Biểu tượng của cô là chiếc vương miện màu vàng.

Fuzzy Lumpkins

Không khác bản Mỹ cho lắm về ngoại hình và tính cách. Hắn vẫn có bộ lông xù màu hồng, hai sợi râu nhô ra trên đỉnh đầu, hai tai màu lục, mắt màu đỏ, mũi to màu tím và miệng có 2 chiếc răng nhô ra từ hàm dưới. Hắn mặc một cái áo liền quần màu lam và đi giày nâu. Fuzzy mê cô Bellum ngay từ cái nhìn đầu tiên và luôn có ý định bắt cóc cô. Hắn luôn nghĩ rằng các Powerpuff Girls Z luôn cản trở việc làm của hắn nên rất ghét họ. Khi tức, Fuzzy tấn công thành phố bằng cách đập phá với sức khỏe cực lớn và in dấu bàn tay của hắn khắp mọi nơi, cốt để dụ và trả thù Powerpuff Girls Z. Biểu tượng của hắn là hình bàn tay màu tím có 4 ngón.

Sedusa

Cô có tên thật tiếng nhật là Sakurako, tiếng Anh là Annie. Lồng tiếng Nhật bởi Rumi Shishido, tiếng Anh bởi Rebecca Shoichet. Xuất hiện lần đầu vào tập phim mang tên cô. Trang phục thường ngày của cô là một bộ quần áo màu lam giản dị, tết tóc 2 bên và buộc đầu bằng một chiếc khăn màu lam trang trí bằng hoa anh đào và đeo kính, đi hài đen; tính cách hiền hòa, thân thiện và đôi khi hơi e dè. Một hôm, các Powerpuff Girls Z tới quán của cô ăn bánh bao, sau khi họ trò chuyện về người tình trong mơ của cô-Jason thì cô Bellum tới uống trà như mọi hôm. Rồi cô Bellum đánh rơi túi đồ trang điểm, Annie giúp cô nhặt lên nhưng cô Bellum quên nhặt thỏi son. Khi cô Bellum và các Powerpuff Girls Z đi khỏi thì Annie nhìn thấy thỏi son và định đem trả thì bị trúng tia hóa chất Z màu đen. Vì cô cầm thỏi son của cô Bellum nên khi cô có vết son trên người thì cô sẽ biến hình và lấy tên là Sedusa. Khi biến hình thì cô mặc áo và váy ngắn màu tím, thắt eo màu vàng trang trí kiểu da rắn, mắt chuyển sang màu vàng và bôi son choe choét, đi vớ cáo tới nửa đùi màu nâu có viền vàng và đôi giày cao gót đỏ. Sedusa là một tên trộm đồ thời trang và son phấn ở các cửa hàng. Nhờ phấn trang điểm mà cô có thể cải trang thành bất cứ ai, kể cả khi cô mới gặp họ lần đầu. Cô còn có thể thôi miên con trai ở mọi lứa tuổi bằng "tuyệt chiêu quyến rũ" của mình.

The Rowdyruff Boys

Xuất hiện lần đầu ở tập 20,The Rowdyruff Boys là nhóm kẻ xấu tạo ra bởi tóc của Mojo Jojo, ADN của các Powerpuff Girls Z (lấy từ ống hút của Blossom, bông ngoáy tai của Bubbles và chiếc tất bẩn của Buttercup) và Hóa chất Z lấy trộm ở phòng thí nghiệm. Xuất hiện lần đầu trong tập phim cùng tên. Thành viên trong nhóm bao gồm 3 người: Brick, Boomer và Butch. Các cậu bé này khác với trong bản ở Mỹ là thích chọc ghẹo các Powerpuff Girls Z thay vì đánh nhau với họ (ví dụ như ăn trộm quần áo của các cô gái ở tập 42) và có tật xấu là hay ngoáy mũi. Họ cũng hay gheo Mojo thay vì trung thành với hắn và gọi Mojo là "Mama". Đồng phục của họ là áo khoác gió mang màu đặc trưng của họ và sọc đen vàng, một quần đen mang sọc vàng và một đôi giày patin màu trắng với bánh xe vàng viền màu tượng trưng của họ.

Brick

Lông tiếng Anh bởi Alberto Ghisi, tiếng Nhật bởi Reiko Kiuchi. Là Anh nhóm trưởng của The Rowdyruff Boys. Cậu có tóc màu vàng cam như Blossom, mặc đồng phục màu đỏ và đội một cái mũ lưỡi trai màu đỏ và đen, đeo một cái băng ở má bên trái. Cậu có mắt màu đỏ và khá ngạo mạn. Cậu là người chuyên nghĩ ra nhưng "trò chơi" cho cả nhóm. Vũ khí của cậu là một cái ống hút (vốn là của Blossom). Cậu có biểu tượng là hình tam giác màu đỏ.

Boomer

Lồng tiếng Anh bởi Aidan Drummond, tiếng Nhật bởi Aoyama Touko. Là thành viên thứ hai của The Rowdyruff Boys. Cậu chín chắn hơn và quậy hơn so với bản gốc. Giống như Bubbles, cậu có mái tóc màu vàng chĩa các chỏm tóc sang hai bên, mắt xanh và mặc đồng phục màu xanh. Vũ khí của cậu là hai cái bông ngoáy tai (vốn đã được Bubbles sử dụng và bỏ đi). Cậu có biểu tượng là hình dấu nhân màu xanh

Butch

Lông tiếng Anh bởi Kathleen Barr, tiếng Nhật bởi Tamaki Yuuki. Là thành viên thứ ba và là thành viên cuối cùng của The Rowdyruff Boys. Cậu thích chiến đấu nhưng không bằng bản gốc. Cậu có tóc màu đen và buộc ở đằng sau như bản gốc, nhưng phần mái thì chéo xuống và che đi một bên mắt. Mắt cậu màu xanh lục như Buttercup và cậu mặc đồng phục màu xanh lá. Cậu mang chiếc tất bẩn (vốn là của Buttercup) làm vũ khí và dùng nó như boomerang. Biểu tượng của cậu là hình thoi màu lục.Cậu cũng hay cùng đồng bọn chọc ghẹo mọi người

Him

Lồng tiếng Anh bởi Mark Oliver, tiếng Nhật bởi Ryusei Nakao. Xuất hiện lần đầu ở tập 30, Him là kẻ xấu cuối cùng xuất hiện và là kẻ xấu xa nhất trong nhóm nhân vật phản diện. Hắn có thể tự tạo ra tia sáng đen và hấp thụ nó.

Alpha và Beta

Chỉ xuất hiện trong manga, Alpha và Betta là cặp rô bốt song sinh vốn được tạo ra để giúp đỡ mọi người, nhưng họ lại trúng tia hóa chất Z màu đen và chống lại cha mẹ họ. Xuất hiện lần đầu ở chap 6, khi lớp của các Powerpuff Girls Z đi tham quan tại nhà máy rô bốt, họ tưởng như đã mất tích nhưng rồi quay lại quậy phá.